Universiti Charles, Universiti Czech Karlova, juga disebut Universiti Prague, institusi pengajian tinggi yang dikendalikan negara di Prague, Republik Czech. Sekolah ini didirikan pada tahun 1348 oleh maharaja Rom Suci Charles IV, dari mana ia mengambil namanya. Ia adalah universiti pertama di Eropah tengah. Di antara bangunannya, yang tersebar di seluruh Prague, adalah Carolinum, salah satu bangunan universiti tertua yang ada di dunia.
Rektor awal universiti, yang dipilih pada tahun 1409, adalah pembaharu agama Bohemian Jan Hus. Selama abad ke-17, orang Yesuit menamakan semula institusi Charles-Ferdinand University setelah maharaja Rom Suci Ferdinand II, yang menempatkan universiti di bawah kendali mereka, tetapi pada akhir abad ke-18, suatu masa penindasan Jesuit, ia menjadi institusi negara. Pada tahun 1882 ia dibahagikan kepada institusi Czech dan Jerman yang terpisah, masing-masing disebut Charles-Ferdinand. Ketika universiti dibuka semula selepas Perang Dunia II (1945), universiti Jerman dihapuskan.
Universiti Charles terdiri daripada fakulti matematik dan fizik, sains semula jadi, perubatan umum, pediatrik, kemanusiaan, undang-undang, kewartawanan, dan pendidikan. Juga dilampirkan ialah Institut Astronomi dan Institut Pendidikan Guru.
